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同位素标记化合物是指通过将化合物中某一个或多个原子或其化学基团被其易辨认的同位素或其它易辨认的核素或基团所取代,从而得到的一种具有特殊标记的化合物。这个标记过程也被称为同位素标记。同位素标记化合物在科学实验和工业生产中有着广泛的应用,例如在生物学、医学、化学、材料科学、环境科学等领域。
常用同位素标记化合物
在碳(C)的多种同位素中,14 C是最常被用于标记化合物的一种。这种同位素具有独特的稳定性,可以在衰变过程中释放出弱β辐射。在多种氨基酸中,14 C常用的标记化合物包括亮氨酸、赖氨酸、脯氨酸等。其中,最常用的标记化合物是亮氨酸,因为这种氨基酸在各种蛋白质中都广泛存在,使得14 C标记的位置有多种选择。
当14 C被用于标记氨基酸时,它可以被添加到氨基酸的α-碳原子上。这种标记方法非常稳定,可以在细胞代谢中保持不变。由于亮氨酸在蛋白质中广泛存在,因此它是最常用的氨基酸之一。在用于蛋白质合成的多肽链中,亮氨酸可以很容易地被识别和替换,这使得研究人员可以更方便地追踪和鉴定蛋白质的合成过程。
除了亮氨酸之外,赖氨酸和脯氨酸也是常用的标记化合物。赖氨酸是一种含有两个氨基基团的氨基酸,它可以与蛋白质中的羰基进行反应,从而在蛋白质中形成稳定的链接。脯氨酸则是一种亚氨基酸,它可以在蛋白质合成过程中参与肽键的形成。
在应用于mRNA的生物活性测定时,14 C标记的位置有多种选择。这是因为mRNA是一种指导蛋白质合成的分子,它可以与多个氨基酸进行链接。因此,无论是在链接氨基酸的过程中还是在肽键形成的过程中,都可以进行14 C标记。至于选择何种氨基酸进行标记,需要视拟合成的蛋白质性质、成分而定。总之,14 C标记化合物在生物化学和分子生物学领域具有广泛的应用价值,可以为研究蛋白质合成、代谢等过程提供重要的工具和方法。
3H常用的标记物有氨基酸或核苷酸。氨基酸的用途同 14 C的氨基酸。核苷酸中最常用的核苷如尿嘧啶核苷及胸腺嘧啶核苷,用于细菌及哺乳动物细胞培养时的核酸标记。核苷三磷酸中以a型的NTP及dNTP为最常用。此处N代表A、G、C、U或T四种碱基。用于核酸的标记,如缺口翻译标记。也可用于染色体原位杂交或电镜核酸分析等。
35 S标记的氨基酸最常用的是蛋氨酸,用途同 14 C标记。[α- 35 S]dNTP中的α位磷酸基中的氧用硫取代,得到的核苷三磷酸,可用于核苷酸序列分析,也可用于缺口翻译法标记DNA。
32 P常用标记物为各种核苷三磷酸。 32 P的标记分两大类。一类标在γ位置,做磷酸转移法标记核酸用,另一类标在α位置,做核苷酸转移标记核酸用。如标记核酸的末端常用[γ- 32 P]ATP,而在缺口翻译标记时则用各种[a- 32 P]dNTP。
125 I常用的是碘化钠溶液,主要用途是标记单链核酸如RNA等分子以及蛋白质。
同位素标记化合物的应用:
第6届国际同位紊和同位紊标记化合物合成及其应用研讨会于1997年9月14日至18日在美国费城召开,来自20余个国家和地区的400余人参加了会议.会上发表论文200余篇,涉及30余种同位紊的应用和标记化合物。其中短寿命同位紊"c."C和F等约占30%。而长寿命同位素"C,H和稳定同位紊D(氘)约占50%。由于绝大多数化合物特别是有机化合物和生物括性物质皆台有碳和氢,故这两种元素的放射性同位紊H,"c和"C等用来标记示踪物,以保证标记后的化合物与标记前的化合物结构完全一致。因此,在标记化合物的合成及应用中,氢,碳的同位紊H,"C,"C同位素应用最为广泛。
会议内容有标记化台物的合成,标记化合物的分析和鉴定,同位素的应用和放射性废物处理四大方面。同位素应用还包括在临床研究和药物中的应用,特别是药物药理,药物动力学研究,在有机与生物有机合成中的应用,在高分子(蛋白.核酸,单抗)研究中的应用。在药物代谢和毒理方面的应用,以及药物学和农业方面的应用。
药物学方面的应用,多偏重于药理和生化机理方面基础研究,如全身代谢、骨钙动力学、抗特异性药物动力学,用生化药物示踪剂研究稳定同位素,标记化合物的连续流动与同位素的比例测算,放射性药物在血色素中的结合等。另外,还有一些如早老性痴呆症,遗传舞蹈病的早期诊断,关节病的治疗等,还有乳腺癌的早期诊断与治疗.乳腺癌是40岁以上妇女多发病,美国每年有l8万新的乳腺府患者,其中3.5%的患者死亡。
为减少死亡率,除了定期进行体格检查外,早期诊断是减少死亡率的重要手段,而放射性标记药物为早期诊断的重要手法之一,长寿命和短寿命放射性同位紊标记药物广泛应用于评价人体(健康志愿者及病人)中的药用该法得到大量的,灵敏的和基本的信息是不可能用其他效学和药物动力学行为、方法得到的。
细胞的全面死亡的快速评价,排泄平衡,组织分布和全面代谢等,都可以在适当的时间内用放射性同位紊的标记化合物来获得.近年来这些方面的研究均取得很大的进展. 短寿命同位紊还用于新药作用机制的评价。PET(PositionEmissionTomography,正电子发射断层显像)技术已用于研究体内物理和生化过程,测量体内生化和药理,诸如代谢的中间产物,各种癌变早期诊断,评价药物受体的内部反应与治疗效果.作用物代谢.脑血流量,神经传递和受倬传递等.特别是中枢神经系统的疾患的诊治。
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